透射电镜注意事项

1.透射电子显微镜使用时注意事项

透射电镜的日常维护注意事项

1.常开机,多使用,这样就能随时掌握仪器工作情况,随时注意观察图、光、声、真空、气压、电源的变化情况,及时调节,作好记录,时间长了肯定会积累很多经验。

2.注意空气湿度、防止老鼠撒泼、电压要稳定、气体要清洁干燥、防止小样品掉入,尤其是细颗粒,粉末、防止碰撞

3.监视电子枪内的氟里昂是否降低,监视机械泵里的油是否降低到水平线以下,空气压缩机时常放放气,循环水装置内的水要定期更换,保持室内湿度在40~70%,温度在15~25度。电镜的修理来说就要有较高的技术水平,一要有兴趣,二要有悟性,主要是实际动手能力,和高超的综合知识的灵活运用,同时还要靠经验的积累,最好是学电子学的人,又有实际能力来管理电镜。

4.旋转泵用的真空油有条件最好一年换一次油。油脏的快慢主要和实验室洁净程度、湿度有关。电镜不用最好也开着,每天抽抽真空,隔一两天电路通通电,学校放假,最好每周开两天,尤其是夏天,暑假结束刚开学是出故障最多的时候。

看粉末样品就更容易使油变浑浊,看到油的颜色比较深就该是时候更换了!我们这边4年才换了一次,据说还有更长时间的。原装油不是很贵300多点吧。还是勤换的好。

2.使用透射电镜观察取材应注意哪些问题,采取哪些措施,核仁水平可能

织从生物活体取下以后,如果不立即进行适当处理,会由于细胞内部各种酶的作用,出现细胞自溶现象。此外,还可能由于污染,微生物在组织内繁殖使细胞的微细结构遭受破坏。因此,为了使细胞结构尽可能保持生前状态,必须做到快、小、准、冷:

(1).动作迅速,组织从活体取下后应在最短时间内 (争取在1分钟内) 投入2.5%戊二醛固定液。

(2).所取组织的体积要小,一般不超过1mm*1mm*1mm。也可将组织修成1mm*1mm*2mm大小长条形。因为固定剂的渗透能力较弱,组织块如果太大,块的内部将不能得到良好的固定。

(3).机械损伤要小,解剖器械应锋利,操作宜轻,避免牵拉、挫伤与挤压。

(4).操作最好在低温(0℃~4℃)下进行,以降低酶的活性,防止细胞自溶。

(5).取材部位要准确。

取材方法:将取出的组织放在洁净的蜡版上,滴一滴预冷的固定液,用两片新的、锋利的刀片成“拉锯式”将组织切下并修小,然后用牙签或镊子将组织块移至盛有冷的固定液的小瓶中。如果组织带有较多的血液和组织液,应先用固定液洗几遍,然后再切成小块固定。

①快速: 为了保持生物材料的活体状态,减少“死后”超微结构变化,样品离体后应在1分钟内浸入预冷固定液中。

②块小: 组织块体积一般在0.5-1mm3。由于固定液渗透速率缓慢,渗透深度较浅,若组织块过大,样品中心部位将得不到良好固定。对于较难一次性取的较小的组织,可适当取大一点的组织,先投入预冷的4%多聚甲醛中固定30min,随后取出切成小块,放入戊二醛固定液中继续低温固定。

③部位准: 肾脏、胰岛、脑垂体等不同部位有不同组织结构,应根据研究目的和要求确定切取部位。为了电镜观察的准确性,取材部位必须要准确,而且,不同实验组的标本尽量取在相同部位(如心肌组织取左心室,则一律取左心室),否则,将无法比较,进而影响观察结果,最终导致电镜观察失败。

④损伤小: 取材用器械应锋利,取材时应避免牵拉、挤压,防止组织受机械损伤。

⑤低温: 为了抑制酶的活性,减少组织自溶,取材最好在低温条件下进行。取下样品所浸泡的固定液也要保持在0~4℃,组织块修切时要在冷固定液中进行。

3.做透射电镜样品钉薄的时候要注意什么

钉轮直径和钉薄深度的关系

在离子减薄中,因为离子束的入射角都很小,所以要注意钉薄后样品的边缘可能会挡住样品的中心部分,钉轮直径(D),钉薄区域(2r)和钉薄深度(d)的关系近似为:d=r2/D

典型的一个3mm直径样品,抛光后的边缘保留宽0.4mm,这样保证样品有足够的机械强度。所以钉薄区域的直径限制在2.2mm。

如用4°离子入射角,在边缘不挡住中心部分的条件下,可得到的最大钉薄深度为:1.1mm*tan4°=77(μm)。

单面钉薄样品的最佳起始厚度,钉薄区域的直径为2.2mm,起始样品厚度应是钉薄深度加上4倍的损伤层厚度。

4.光镜和透射电镜标本制作异同有哪些

光学显微镜:

1.活体观察:可采用压滴法,悬滴法及菌丝埋片法等在明视野、暗视野或相差显微镜下对生物活体进行直接观察。

2.染色观察:如需要观察其内部细致结构时,一般都需要对其进行染色,借助颜色反衬作用提高观察样品不同部位的反差。

透射电子显微镜:

透射电子显微镜需要对电子进行激发,所以制片技术比较特殊,主要有以下技术:

1.负染技术:用电子密度高,本身不显结构且与样品几乎不反应的物质来对样品进行染色。

2.投影技术:在真空蒸等对电子散射较强发设备中将铂或铬的物质由样品的斜上方进行喷涂,提高样品的反差。

我就是生物专业的,所以这个回答还是比较靠谱的,希望采纳。

透射电镜注意事项

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